Imobilizacija enzima na mezoporoznu siliku funkcionalizarnu (3-aminopropil)trietoksisilanom

diplomski rad

• Naslov (engleski): Enzyme immobilisation on mesoporous silica functionalised by (3-aminopropyl)triethoxysilane
• Autor: Laura Markanović
• Mentor: Ana Vrsalović Presečki (mentor)
• Član povjerenstva: Ana Vrsalović Presečki (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Gordana Matijašić (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Marija Vuković Domanovac (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Fakultet kemijskog inženjerstva i tehnologije; Zagreb
• Datum i država obrane: 2022-09-29, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: TEHNIČKE ZNANOSTI; Kemijsko inženjerstvo

Sažetak

2-Deoksi-D-riboza-5-fosfat aldolaza (DERA) je katalizator u reakciji dvostruke aldolne adicije acetaldehida i kloroacetaldehida gdje kao produkt nastaje 6-kloro-3,5-dihidroksiheksanal (laktol), intermedijer za proizvodnju statina, lijekova za snižavanje kolesterola. Međutim, visoka koncentracija aldehida ima vrlo negativan utjecaj na stabilnost enzima u reakciji stoga je cilj ovog rada provesti imobilizaciju enzima DERA-e kovalentnim vezanjem na MCF siliku kao nosioc, u svrhu njegove stabilizacije. Silika je sintetizirana sol-gel metodom te je prethodno imobilizaciji funkcionalizirana APTES-om, potom aktivirana. Provedeno je optimiranje vrste i koncentracije aktivacijskog sredstva te su u tu svrhu ispitivani su benzokinon, glutaraldehid te GPTMS različitih koncentracija. Potom je također ispitan utjecaj pH vrijednosti imobilizacijskog pufera na uspješnost imobilizacije. Pokazalo se da su optimalni uvjeti imobilizacije dobiveni s 15%-tnim glutaraldehidom pri pH 6. Konačno, optimalni uvjeti su ispitani na silici većih pora te je pokazano kako promjer pora ima utjecaj na uspješnost imobilizacije.

Sažetak (engleski)

2-Deoxy-D-ribose-5-phosphate aldolase (DERA) is a catalyst in the double aldol addition reaction of acetaldehyde and chloroacetaldehyde, where 6-chloro-3,5-dihydroxyhexanal (lactol) is formed as a product, an intermediate in the production of statins, drugs used to lower cholesterol. However, a high concentration of the aldehyde has a negative effect on the stability of the enzyme in the reaction. The aim of this work is to immobilize the enzyme DERA by covalent binding to MCF silica as a carrier, in order to stabilize it. The silica was synthesized by sol-gel method and functionalized with APTES and then activated before immobilization. Optimization of the type and concentration of the activating agent was performed, and for this purpose, benzoquinone, glutaraldehyde and GPTMS were tested at different concentrations. Subsequently, the influence of the pH of the immobilization buffer on the success of immobilization was also investigated. It was found that the optimal immobilization conditions were obtained with 15% glutaraldehyde at pH 6. Finally, the optimal conditions were tested on silica with larger pores, and it was shown that the pore diameter has an influence on the success of immobilization.

• Ključne riječi: imobilizacija enzima; DERA; aktivacija; APTES; aldolna adicija; MCF silika
• Ključne riječi (engleski): enzyme immobilization; DERA; activation; APTES; aldol addition; MCF silica
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:149:947977
• Studijski program: Naziv: Kemija i inženjerstvo materijala; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: diplomski; Akademski / stručni naziv: magistar/magistra inženjer/inženjerka kemijskog inženjerstva (mag. ing. cheming.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Zatvoreni pristup
• Datum i vrijeme pohrane: 2023-03-28 10:20:07