Pročišćavanje enzima endo-1,4-ksilanaze proizvedene fermentacijom Trametes versicolor na čvrstim nosačima

završni rad

• Naslov (engleski): Purification of endo-1,4-xylanase produced by solid-state fermentation of Trametes versicolor
• Autor: Mia Franolić
• Mentor: Anita Šalić (mentor)
• Član povjerenstva: Anita Šalić (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Bruno Zelić (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Dajana Kučić Grgić (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Fakultet kemijskog inženjerstva i tehnologije; Zagreb
• Datum i država obrane: 2021-09-07, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: TEHNIČKE ZNANOSTI; Kemijsko inženjerstvo

Sažetak

Ksilanaza je enzim koji je komercijalno najzastupljeniji u industriji papira, no značajnu primjenu ima i u procesima proizvodnje životinjske hrane, tijekom ekstrakcije prirodnih sokova iz voća i povrća, pekarstvu, tekstilnoj i mnogim drugim industrijama. Kako bi korištenje enzima u industriji bilo što isplativije, bitno je proizvesti cjenovno prihvatljiv enzim visoke aktivnosti i koncentracije. Jedan od ekonomski najopravdanijih načina proizvodnje enzima ksilanaza je fermentacija na čvrstim nosačima pri čemu se kao supstrat koristi različiti otpad iz prehrambene industrije. Na taj način dobiva se smjesa različitih enzima te je enzim ksilanazu potrebno pročistiti od drugih enzima i nečistoća iz podloge. Jednom kada je ksilanaza pročišćena, moguće ju je primijeniti u željenim industrijskim procesima, iako se u nekim slučajevima koristi i sirovi ekstrakt ovog enzima. Cilj ovog rada bio je pročistiti enzim endo-1,4-ksilanazu proizvedenu fermentacijom Trametes versicolor na čvrstim nosačima. Pročišćavanje je provedeno u nekoliko koraka od kojih je prvi bio uparavanje nakon kojega je slijedilo isoljavanje amonijevim sulfatom. Kako bi nakon procesa isoljavanja uklonili sol, provedena je dijaliza uzorka. Uzorak je nakon dijalize podvrgnut pročišćavanju kromatografijom isključenja po veličini na gelu Sephadex G-100. Uspješnost pročišćavanja praćena je mjerenjem aktivnosti enzima ksilanaza i koncentracije proteina nakon svakog koraka pročišćavanja.

Sažetak (engleski)

Xylanase is an enzyme most commonly found in the paper industry, but also has significant applications in the production of animal feed, in the extraction of natural juices from fruits and vegetables, in bakery, in the textile industry and in many other industries. In order to make the use of enzymes in industry as cost effective as possible, it is important to produce an affordable enzyme with high activity and concentration. One of the most economical ways to produce the enzyme xylanases is by fermentation on solid supports, using various wastes from the food industry as substrate. In this way, a mixture of different enzymes is obtained, and the enzyme xylanase needs to be purified from other enzymes and impurities from the substrate. Once the xylanase is purified, it can be applied in the desired industrial processes, although in some cases a crude extract of this enzyme is also used. The aim of this work was to purify the enzyme endo-1,4-xylanase produced by fermentation of Trametes versicolor on solid supports. Purification was carried out in several steps, the first of which was evaporation followed by salting with ammonium sulfate. To remove the salt after salting process, dialysis of the sample was performed. After dialysis, the sample was purified by size exclusion chromatography on Sephadex G-100 gel. Purification success was monitored by measuring xylanase enzyme activity and protein concentration after each purification step.

• Ključne riječi: Trametes versicolor; enzim ksilanaza; pročišćavanje; aktivnost enzima
• Ključne riječi (engleski): Trametes versicolor; xylanase; purification; enzyme activity
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:149:750492
• Projekt: Šifra: KK.01.1.1.04.0107; Naziv: Biokonverzija lignoceluloznog materijala u visokovrijednu hranu za životinje; Naziv: Bioconversion of lignocellulosic material into high-value animal feed; Kratica: Bio4Feed; Voditelj: Mirela Planinić; Pravna nadležnost: eu; Financijer: EK; Linija financiranja: EFRR
• Studijski program: Naziv: Kemijsko inženjerstvo; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: preddiplomski; Akademski / stručni naziv: sveučilišni/a prvostupnik/ prvostupnica (baccalaureus/baccalaurea) inženjer/inženjerka kemijskog inženjerstva (univ. bacc. ing. cheming.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Pristup korisnicima matične ustanove
• Datum i vrijeme pohrane: 2023-03-29 09:25:43